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技術文章 / article
A-704細胞A-704細胞株的復蘇方法
2017-02-09 瀏覽次數：1747
A-704細胞A-704細胞株的復蘇方法
產品名稱：A-704細胞
中文名稱：腎細胞癌細胞
貨號：A-704
規格：1~3*106細胞/25cm2培養瓶
上海蒂科生物 細胞株、血清、培養基、 各種細胞培養相關試劑，開學酬賓*中，更多產品，更大優惠，敬請！！
一、細胞復蘇的原則
在實際操作中，凍存細胞要進行復蘇，再培養傳代。復蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細胞內，再次形成胞內結晶損傷細胞。
二、細胞復蘇的主要操作步驟
（1）佩戴眼鏡和手套，從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。
（2）迅速放入 38℃水浴中，并不時搖動，在1分鐘內使其*融化，然后在無菌下取出細胞。
（3）在1000r/min速度下離心5～10分鐘，棄去上層液，加入適量培養液后接種于培養瓶中，接種濃度1×109/L，置37℃溫箱靜置培養，次日更換一次培養液，繼續培養，觀察生長情況。若細胞密度較高，及時傳代。或無需離心直接將細胞加入瓶中，并加入培養基貼壁培養12～24小時后，充去上清，換入新鮮培養基繼續培養。
三、注意事項
在細胞復蘇操作時，應注意融化凍存細胞速度要快，可不時搖動安瓿或冷凍管，使之盡快通過zui易受損的溫度段（-5～0℃）。這樣復蘇的凍存細胞存活率高，生長及形態良好。然而，由于凍存的細胞還受其他因素的影響，有時也會有部分細胞死亡。此時，可將不貼壁、飄浮在培養液上（已死亡）的細胞輕輕倒掉，再補以適量的新培養液，也會獲得較為滿意的結果。
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