加入收藏 | 設(shè)為首頁 | 聯(lián)系我們

    產(chǎn)品搜索

    聯(lián)系我們

    聯(lián)系人:陳經(jīng)理
    電話:021-56980380
    傳真:
    手機:17321440983
    地址:上海市嘉定區(qū)翔江公路518弄D座2樓

    技術(shù)文章 / article
    當(dāng)前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > Raji細胞| Raji細胞系 培養(yǎng)步驟

    Raji細胞| Raji細胞系 培養(yǎng)步驟

    2021-06-06 瀏覽次數(shù):3288

    Raji細胞| Raji細胞系 培養(yǎng)步驟

    產(chǎn)品名稱:Raji細胞

    中文名稱:人淋巴瘤細胞;Raji

    規(guī)格:T25

     

    培養(yǎng)步驟:

    1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

     

    1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

    1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

    2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。

    3.輕輕吹打細胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

    4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

    PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。

    2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

    方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

    方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

     

    3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

     

    PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。

    化工儀器網(wǎng)

    推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
    主站蜘蛛池模板: 国产成人久久精品一区二区三区| 国产日韩一区二区三区在线观看| 国产成人无码一区二区在线观看| 91在线一区二区| 久久影院亚洲一区| 久久青草精品一区二区三区| 日韩中文字幕精品免费一区| 日韩国产免费一区二区三区| 亚洲一区二区三区在线播放 | 久久婷婷久久一区二区三区| 国产一区二区三区四| 亚洲国产欧美国产综合一区 | 国产爆乳无码一区二区麻豆| 亚洲AV无码一区东京热久久| 亚洲综合一区国产精品| 亚洲AV成人一区二区三区在线看| 中文字幕精品一区二区精品| 亚洲国产精品自在线一区二区| 夜色福利一区二区三区| 久久婷婷色综合一区二区| 亚洲韩国精品无码一区二区三区| 国产精品va一区二区三区| 亚洲一区无码精品色| 97se色综合一区二区二区| 精品成人乱色一区二区| 亚洲午夜精品一区二区公牛电影院| 精品无码一区二区三区爱欲九九| 无码人妻一区二区三区免费n鬼沢 无码人妻一区二区三区免费看 | 在线电影一区二区三区| 色婷婷一区二区三区四区成人网 | 久久国产一区二区三区| 性无码一区二区三区在线观看| 国产亚洲一区二区三区在线观看| 亚洲狠狠久久综合一区77777| 日本激情一区二区三区| 午夜福利国产一区二区| 少妇精品久久久一区二区三区| 亚洲a∨无码一区二区| 亚洲国产精品一区二区第四页| 午夜福利一区二区三区高清视频| 精品久久久久久中文字幕一区|