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技術(shù)文章 / article
支原體污染對細胞培養(yǎng)的危害！
2022-03-03 瀏覽次數(shù)：1114
1.支原體污染的普遍性
支原體污染是細胞培養(yǎng)領(lǐng)域遇到的性問題，據(jù)文獻報道，綜合美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）、美國模式菌種收集中心(ATCC)等機構(gòu)收到的相關(guān)數(shù)據(jù)，世界各國細胞系支原體污染的平均比例為30-60%。該數(shù)據(jù)未統(tǒng)計中國大陸的數(shù)據(jù)，但可以確定，大陸地區(qū)的支原體污染比例與此相當(dāng)，或更嚴(yán)重。
2.支原體污染的危害
根據(jù)已發(fā)表的支原體污染研究文獻，支原體污染細胞后，幾乎能影響每一個細胞參數(shù)。
1）支原體污染可能導(dǎo)致細胞染色體的異常和損傷，改變細胞的代謝、生長、形狀、附著。
2）支原體影響被污染細胞的基因表達。相關(guān)研究表明，支原體污染的細胞系與對照組比較，有多達200個基因表達差異達2倍以上。
3）導(dǎo)致MTT等細胞毒性實驗結(jié)果嚴(yán)重錯誤。支原體對MTT有額外還原作用。
4）支原體污染能耗盡營養(yǎng)物，促進代謝積累，重度支原體污染導(dǎo)致pH改變。
5）誘導(dǎo)或抑制細胞因子表達，并改變培養(yǎng)細胞的代謝、增殖特征及形態(tài)。支原體污染可以直接影響L-arginine的代謝
6）支原體污染可以誘導(dǎo)樹突狀細胞成熟，這對于開展人體免疫細胞的腫瘤治療的影響將是災(zāi)難性的。
3.支原體污染的隱蔽性
支原體大小約0.1-0.6微米，體積比病毒稍大，輕度到中度的支原體污染不會明顯改變細胞培養(yǎng)液的渾濁度和pH值，也不會導(dǎo)致細胞形態(tài)或生長速度的明顯改變，所以科研人員很難及時發(fā)現(xiàn)體外培養(yǎng)的細胞已經(jīng)被支原體污染，進而改變了基因表達譜，顯示虛假的實驗數(shù)據(jù)和實驗結(jié)果。通常情況下，如果不排除支原體污染因素，很多實驗結(jié)果往往缺乏說服力。2013年，Ding級期刊《Nature》明確要求，在涉及細胞培養(yǎng)的科研工作中，必須進行支原體檢測，并排除其影響。
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