酶的活性指標(biāo)有哪些？

酶催化化學(xué)反應(yīng)的能力叫酶活力(或稱酶活性,active unit)。1961年國(guó)際酶學(xué)會(huì)議規(guī)定:1個(gè)酶活力單位是指在特定條件(25℃,其它為最適條件)下,在1min內(nèi)能轉(zhuǎn)化1μmol底物的酶量,或是轉(zhuǎn)化底物中1μmol的有關(guān)基團(tuán)的酶量。

影響因素

酶活力可受多種因素的調(diào)節(jié)控制,從而使生物體能適應(yīng)外界條件的變化,維持生命活動(dòng)。沒有酶的參與,新陳代謝幾乎不可能維持。酶的活性指標(biāo)采用酶活力單位(由米式方程可知:酶促反應(yīng)速度受酶濃度和底物濃度的影響,也受溫度、pH、激活劑和抑制劑的影響。

(1)酶濃度

從米式方程和酶濃度與酶促反應(yīng)速度的關(guān)系圖解可以看出:酶促反應(yīng)速度與酶分子的濃度成正比。當(dāng)?shù)孜锓肿訚舛茸銐驎r(shí),酶分子越多,底物轉(zhuǎn)化的速度越快。但事實(shí)上,當(dāng)酶濃度很高時(shí),并不保持這種關(guān)系,曲線逐漸趨向平緩。根據(jù)分析,這可能是高濃度的底物夾帶有許多的抑制劑所致。

(2)底物濃度

在生化反應(yīng)中,若酶的濃度為定值,底物的起始濃度較低時(shí),酶促反應(yīng)速度與底物濃度成正比,即隨底物濃度的增加而增加。當(dāng)所有的酶與底物結(jié)合生成中間產(chǎn)物后,即使在增加底物濃度,中間產(chǎn)物濃度也不會(huì)增加,酶促反應(yīng)速度也不增加。

還可以得出,在底物濃度相同條件下,酶促反應(yīng)速度與酶的初始濃度成正比。酶的初始濃度大,其酶促反應(yīng)速度就大。

在實(shí)際測(cè)定中,即使酶濃度足夠高,隨底物濃度的升高,酶促反應(yīng)速度并沒有因此增加,甚至受到抑制。其原因是:高濃度底物降低了水的有效濃度,降低了分子擴(kuò)散性,從而降低了酶促反應(yīng)速度。過量的底物聚集在酶分子上,生成無(wú)活性的中間產(chǎn)物,不能釋放出酶分子,從而也會(huì)降低反應(yīng)速度。

(3)溫度

各種酶在最適溫度范圍內(nèi),酶活性強(qiáng),酶促反應(yīng)速度最大。在適宜的溫度范圍內(nèi),溫度每升高10℃,酶促反應(yīng)速度可以相應(yīng)提高1～2倍。不同生物體內(nèi)酶的最適溫度不同。如,動(dòng)物組織中各種酶的最適溫度為37～40℃;微生物體內(nèi)各種酶的最適溫度為25～60℃,但也有例外,如黑曲糖化酶的最適溫度為62～64℃;巨大芽孢桿菌、短乳酸桿菌、產(chǎn)氣桿菌等體內(nèi)的葡萄糖異構(gòu)酶的最適溫度為80℃;枯草桿菌的液化型淀粉酶的最適溫度為85～94℃。可見,一些芽孢桿菌的酶的熱穩(wěn)定性較高。過高或過低的溫度都會(huì)降低酶的催化效率,即降低酶促反應(yīng)速度。

最適溫度在60℃以下的酶,當(dāng)溫度達(dá)到60～80℃時(shí),大部分酶被破壞,發(fā)生不可逆變性;當(dāng)溫度接近100℃時(shí),酶的催化作用*喪失。這也就是為何人在發(fā)燒時(shí),不想吃東西的原因。

(4)pH

酶在最適pH范圍內(nèi)表現(xiàn)出活性,大于或小于最適pH,都會(huì)降低酶活性。主要表現(xiàn)在兩個(gè)方面:①改變底物分子和酶分子的帶電狀態(tài),從而影響酶和底物的結(jié)合;②過高或過低的pH都會(huì)影響酶的穩(wěn)定性,進(jìn)而使酶遭受不可逆破壞。人體中的大部分酶所處環(huán)境的pH值越接近7,催化效果越好。但人體中的胃蛋白酶卻適宜在pH值為1~2的環(huán)境中,胰蛋白酶的最適pH在8左右。

(5)激活劑

能激活酶的物質(zhì)稱為酶的激活劑。

激活劑種類:

①無(wú)機(jī)陽(yáng)離子,如鈉離子、鉀離子、銅離子、鈣離子等;

②無(wú)機(jī)陰離子,如氯離子、溴離子、碘離子、硫酸鹽離子磷酸鹽離子等;

③有機(jī)化合物,如維生suC、半胱氨酸、還原性谷胱甘肽等。許多酶只有當(dāng)某一種適當(dāng)?shù)募せ顒┐嬖跁r(shí),才表現(xiàn)出催化活性或強(qiáng)化其催化活性,這稱為對(duì)酶的激活作用。而有些酶被合成后呈現(xiàn)無(wú)活性狀態(tài),這種酶稱為酶原。它必須經(jīng)過適當(dāng)?shù)募せ顒┘せ詈蟛啪呋钚浴?br/>
(6)抑制劑

能減弱、抑制甚至破壞酶活性的物質(zhì)稱為酶的抑制劑。它可降低酶促反應(yīng)速度。酶的抑制劑有重金屬離子、一氧化碳、硫化氫、氫氰suan、氟化物、碘化乙酸、生物堿、染料、對(duì)-氯汞苯甲酸、二異丙基氟磷酸、乙二胺四乙酸、表面活性劑等。

對(duì)酶促反應(yīng)的抑制可分為競(jìng)爭(zhēng)性抑制和非競(jìng)爭(zhēng)性抑制。與底物結(jié)構(gòu)類似的物質(zhì)爭(zhēng)先與酶的活性中心結(jié)合,從而降低酶促反應(yīng)速度,這種作用稱為競(jìng)爭(zhēng)性抑制。競(jìng)爭(zhēng)性抑制是可逆性抑制,通過增加底物濃度最終可解除抑制,恢復(fù)酶的活性。與底物結(jié)構(gòu)類似的物質(zhì)稱為競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。抑制劑與酶活性中心以外的位點(diǎn)結(jié)合后,底物仍可與酶活性中心結(jié)合,但酶不顯示活性,這種作用稱為非競(jìng)爭(zhēng)性抑制。非競(jìng)爭(zhēng)性抑制是不可逆的,增加底物濃度并不能解除對(duì)酶活性的抑制。與酶活性中心以外的位點(diǎn)結(jié)合的抑制劑,稱為非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。

有的物質(zhì)既可作為一種酶的抑制劑,又可作為另一種酶的激活劑。