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    動物血清的正確熱滅活方法

    2022-09-28 瀏覽次數:940

    動物血清的熱滅活非常容易造成蛋白析出增多,若非必要,可以無需做此操作。若必須做動物血清的熱滅活,請嚴格遵守以下步驟:

    1、保證血清*融化狀態,溫度接近常溫。

    2、保證水浴溫度56℃、30分鐘的原則,在水浴過程中每隔2-3分鐘搖晃瓶子,使血清內部受熱均勻,直至滅活時間結束。

    注意事項:

    溫度過高、時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多,甚至嚴重影響血清的品質。在56℃水浴中,持續恒溫30分鐘。在此過程中每隔2-3分鐘搖晃瓶子,使其受熱均勻,減少蛋白的析出。

    為什么要熱滅活血清?

    加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。

    實驗顯示,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是小黑點,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。若非必須,可以不需要做熱處理這一步。不但節省時間,更確保血清的質量!

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