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胎牛血清質檢標準解讀

2023-10-27 瀏覽次數:1344

【胎牛血清】

 

胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)指通過對未出生的胎牛行穿刺采血,再經自然層析、離心、過濾等處理而得到的上清液。在細胞培養體系中,血清是不屬于人工合成的成分,同時也讓血清成分成為細胞培養體系中最大的不確定因素,因此,如何保障胎牛血清的質量是細胞培養得好壞的決定性因素之一。

【胎牛血清的檢測指標】

胎牛血清的COA中,常規的檢測標準包括內毒素、總蛋白、支原體、細菌、病毒、滲透壓、總蛋白等。胎牛血清產品分析證書(COA)就是FBS質控的重要體現。
 

【理化檢測】

外觀

胎牛血清外觀顏色根據血紅蛋白含量的不同,呈現出的淺棕色或琥珀色,優質的胎牛血清應該是淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。但不同批次間的同一款血清,顏色上也可能存在一定差異。

PH

《中國藥典2020版》中對新生牛血清的標準 pH 值應為7.00~8.50。藥典中未明確對胎牛血清做出pH 值要求,行業內均以此為參考。一般采用電位法進行測定。

滲透壓

 滲透壓的檢測一般采用冰點下降法,滲透壓是為了維持細胞張力,調節細胞的代謝。滲透壓摩爾濃度(mOsmol/kg):250-330之間。

總蛋白

測量血清中蛋白質總含量可確認動物的年齡及符合產品的規格,采用的雙縮脲法進行檢測,該方法實驗反應產生的紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比,故可用來測定蛋白質含量。

血紅蛋白

紅蛋白含量決定血清色澤的因素是血紅蛋白和膽紅素,前者含量高,則呈現偏紅的顏色,后者高則呈現為金黃色。

細菌內毒素

內毒素會因為啟動補體活性而產生細胞毒性,內毒素控制在10EU/ml以內符合國家標準,過高的內毒素將會對部分細胞產生刺激作用,影響細胞生長。

 

 

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