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新聞動態 / news
YAPC細胞供應 蒂科生物
2017-01-17 瀏覽次數：2469
YAPC細胞
貨 號：SUER1929（XR)
產品名稱：YAPC
細胞形態：上皮樣
傳代情況：P3-P5
產品規格：1~3*106細胞/25cm2培養瓶
YAPC細胞
培養條件：RPMI 1640+ 15% FBS
生長特性：貼壁生長
傳代方法：1:2~1：8傳代；2-3天傳代一次。1:3傳代,2-3天傳一代
生長條件：95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度
YAPC細胞
對于貼壁細胞，若細胞漂浮：培養瓶不開封，用75%酒精擦拭后平躺置于培養箱內。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，換成新鮮的培養基；如細胞還不貼壁，將細胞離心收集移到新的培養瓶中，原培養瓶加部分新鮮培養液繼續培養，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。對于懸浮細胞：收到細胞后，將細胞全部離心，去掉舊的培養基，換成新鮮的培養基繼續培養。
特別注意：（如使用公共實驗室或者初次接觸，建議添加雙抗培養）
貼壁細胞收到當天有少量或沒有飄忽的細胞可以當天換液，因為路途顛簸造成大量飄忽的情況時，請將細胞換液后放置培養箱孵育到第二天再做消化傳代，請優先選擇直徑6cm的培養皿進行傳代培養
收到細胞后請盡快更換為含10%血清的新鮮培養基，如因特殊情況需要繼續使用原瓶，請在原瓶培養基中額外添加10%的血清，（原瓶培養基的繼續使用時間zui長不宜超過72小時）
如簽收時出現培養瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并SUER技術人員
細胞接收后的操作流程與注意事項：
貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度（zui高不能超過20%），或可根據該細胞生長特性生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養瓶繼續培養
如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天；同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基培養3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增值而是繼續脫落死亡，請及時實驗室技術人員會跟進解決
生長不均：貼壁細胞若出現分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養基進行培養
細胞常規培養傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）
吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通常控制在1-2min）
注意培養基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存
取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的*培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養
鏡下觀察消化情況，在細胞生長特性邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂浮）去掉胰酶，加6-8ml*培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
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