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    AN3 CA細胞,AN3 CA細胞株的復(fù)蘇方法

    2017-02-09 瀏覽次數(shù):1397

    AN3 CA細胞,AN3 CA細胞株的復(fù)蘇方法

    產(chǎn)品名稱:AN3 CA細胞

    中文名稱:星形細胞瘤細胞

    貨號:AN3 CA

    規(guī)格:1~3*106細胞/25cm2培養(yǎng)瓶

    上海蒂科生物 細胞株、血清、培養(yǎng)基、 各種細胞培養(yǎng)相關(guān)試劑,開學(xué)酬賓*中,更多產(chǎn)品,更大優(yōu)惠,敬請!!

     

    一、細胞復(fù)蘇的原則

    在實際操作中,凍存細胞要進行復(fù)蘇,再培養(yǎng)傳代。復(fù)蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結(jié)晶快速融化,以避免慢速融化水分滲入細胞內(nèi),再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細胞。

    二、細胞復(fù)蘇的主要操作步驟

    (1)佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。

    (2)迅速放入 38℃水浴中,并不時搖動,在1分鐘內(nèi)使其*融化,然后在無菌下取出細胞。

    (3)在1000r/min速度下離心5~10分鐘,棄去上層液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,接種濃度1×109/L,置37℃溫箱靜置培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細胞密度較高,及時傳代。或無需離心直接將細胞加入瓶中,并加入培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)12~24小時后,充去上清,換入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

    三、注意事項

    在細胞復(fù)蘇操作時,應(yīng)注意融化凍存細胞速度要快,可不時搖動安瓿或冷凍管,使之盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。這樣復(fù)蘇的凍存細胞存活率高,生長及形態(tài)良好。然而,由于凍存的細胞還受其他因素的影響,有時也會有部分細胞死亡。此時,可將不貼壁、飄浮在培養(yǎng)液上(已死亡)的細胞輕輕倒掉,再補以適量的新培養(yǎng)液,也會獲得較為滿意的結(jié)果。

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