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    BCP-1細胞,BCP-1細胞株的復蘇方法

    2017-02-09 瀏覽次數:1491

    BCP-1細胞,BCP-1細胞株的復蘇方法

    產品名稱:BCP-1細胞

    中文名稱:B細胞淋巴瘤不明細胞

    貨號:BCP-1

    規格:1~3*106細胞/25cm2培養瓶

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    一、細胞復蘇的原則

    在實際操作中,凍存細胞要進行復蘇,再培養傳代。復蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結晶快速融化,以避免慢速融化水分滲入細胞內,再次形成胞內結晶損傷細胞。

    二、細胞復蘇的主要操作步驟

    (1)佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。

    (2)迅速放入 38℃水浴中,并不時搖動,在1分鐘內使其*融化,然后在無菌下取出細胞。

    (3)在1000r/min速度下離心5~10分鐘,棄去上層液,加入適量培養液后接種于培養瓶中,接種濃度1×109/L,置37℃溫箱靜置培養,次日更換一次培養液,繼續培養,觀察生長情況。若細胞密度較高,及時傳代。或無需離心直接將細胞加入瓶中,并加入培養基貼壁培養12~24小時后,充去上清,換入新鮮培養基繼續培養。

    三、注意事項

    在細胞復蘇操作時,應注意融化凍存細胞速度要快,可不時搖動安瓿或冷凍管,使之盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。這樣復蘇的凍存細胞存活率高,生長及形態良好。然而,由于凍存的細胞還受其他因素的影響,有時也會有部分細胞死亡。此時,可將不貼壁、飄浮在培養液上(已死亡)的細胞輕輕倒掉,再補以適量的新培養液,也會獲得較為滿意的結果。

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