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BHK-21 [C-13]倉鼠腎成纖維細胞培養(yǎng)傳代就像養(yǎng)孩子，甚至比養(yǎng)孩子還難。培養(yǎng)液的問題比較大。因 此配制培養(yǎng)液后一定要做無菌試驗，過濾時要注意濾膜本身及其安裝是否有問題；其次，要排除培 養(yǎng)液保存問題，比如，瓶蓋有裂隙或者是蓋子與瓶口不合，密閉性差，容易細菌污染。還有就是操 作過程中出了問題，不注意無菌操作，消毒不嚴格，造成培養(yǎng)液的污染。超凈工作臺、手的消毒， 拿培養(yǎng)瓶時不要拿蓋子及其周圍，培養(yǎng)液開蓋后要斜著放，瓶蓋橫放，蓋口不要向上或向下，培養(yǎng) 瓶等盡量放在工作臺的中間等等。總之，關鍵是無菌及無菌操作，做到這兩點應該不會出什么差錯 了。

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產(chǎn)品名稱：BHK-21 [C-13]倉鼠腎成纖維細胞培養(yǎng)傳代

庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨

細胞規(guī)格：株

質(zhì)控標準：無支原體、無污染、符合標準

運輸方式：新鮮運輸和凍存管運輸

貨期：新鮮運輸需要1-2周，凍存管運輸?shù)男枰?-3天

我公司致力于生物醫(yī)藥領域的技術研發(fā)與生物試劑的銷售，力求為中國廣大生物科技研究者提供zui快捷的貼心服務。公司集研發(fā)、銷售、實驗室技術服務于一體，并以多家歐美研究平臺先進的技術實力為依托，向中國市場提供品質(zhì)國內(nèi)價格的*服務，專業(yè)提供實驗所需的各類細胞株，因子，抗體等多種生物試劑。公司細胞主要來源ATCC,ECACC,ScienCell,ACC, Invitrogen 等，以及少數(shù)國內(nèi)外大學建系。同時提供各種技術服務 整體課題 論文（SCI）服務等。輕小利，重品質(zhì)。避浮夸，求務實。您的滿意，將是我們不懈的追求。竭誠歡迎廣大生物科技研究老師，前來咨詢合作

細胞培養(yǎng)中常見的污染情況總結(jié)
1、細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。
仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理
 
2、霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，37度孵箱培養(yǎng)2-3天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移，采用過氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把過氧乙酸放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應定期清潔（2月左右），尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外燈照。預防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或放線菌素D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或放線菌素D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞。，將環(huán)境*消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
 
3、支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死亡。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。
 
4、黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率。
 
5、真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
 
6、原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中（不加細胞），37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗（硫酸鏈霉素和氨芐青霉素）。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。

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