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    大鼠胰島素ELISA試劑盒
    名稱 大鼠胰島素ELISA試劑盒
    型號(hào)
    報(bào)價(jià)
    特點(diǎn) 產(chǎn)品名稱:大鼠胰島素ELISA試劑盒
    產(chǎn)品規(guī)格:48T、96T
    產(chǎn)品產(chǎn)地:上海
    適用范圍:僅供科研
    庫(kù)存:現(xiàn)貨
    保存及有效期:2-8℃,六個(gè)月}
    • 詳細(xì)內(nèi)容

    產(chǎn)品名稱:大鼠胰島素ELISA試劑盒

    ELISA的基本原理是:

    ①使抗原(或抗體)結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;


    ②使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo) 抗原(或抗體),而且此酶標(biāo)抗原(或抗體)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;


    ③測(cè)定時(shí)將受檢標(biāo)本(抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原(或 抗體)按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進(jìn)行反應(yīng),再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開(kāi),最后結(jié)合 在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的抗體或抗原量成一定比例;再加入酶反應(yīng)底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物,根據(jù)其顏色反應(yīng)的 深淺進(jìn)行定性或定量分析,以了解被測(cè)標(biāo)本中抗體或抗原含量。


    ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在中 除正常反應(yīng)外,有時(shí)常可見(jiàn)到一些錯(cuò)誤結(jié)果(即假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果)。引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:①標(biāo)本因素;②試 劑因素;③操作因素。本文就標(biāo)本因素對(duì)ELISA測(cè)定的影響做如下討論。 血清是常用的ELISA標(biāo)本,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本引起的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內(nèi)源 性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種。


    樣品收集、處理及保存方法

    1.  血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

    2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

    3.  細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

    4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

    5.  保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。


    自備物品

    1.酶標(biāo)儀(450nm)

    2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

    3.37℃恒溫箱


    操作注意事項(xiàng)

    1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。

    2.  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

    3.  濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說(shuō)明書(shū)操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。

    4.  嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

    5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

    試劑盒組成

    名稱

    96孔配置

    48孔配置

    備注

    微孔酶標(biāo)板

    12孔×8條

    12孔×4條

    無(wú)

    標(biāo)準(zhǔn)品

    0.3mL*6管

    0.3mL*6管

    無(wú)

    樣本稀釋液

    6mL

    3mL

    無(wú)

    檢測(cè)抗體-HRP

    10mL

    5mL

    無(wú)

    20×洗滌緩沖液

    25mL

    15mL

    按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋

    底物A

    6mL

    3mL

    無(wú)

    底物B

    6mL

    3mL

    無(wú)

    終止液

    6mL

    3mL

    無(wú)

    封板膜

    2張

    2張

    無(wú)

    說(shuō)明書(shū)

    1份

    1份

    無(wú)

    自封袋

    1個(gè)

    1個(gè)

    無(wú)

    注:標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S5)濃度依次為:0、7.5、15、30、60、120 pg/mL


    大鼠胰島素ELISA試劑盒

    試劑的準(zhǔn)備

    20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

    洗板方法

    1.  手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

    2.  自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。


    操作步驟

    1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

    2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

    3.  樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

    4.  除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

    5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

    6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

    7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。


    試劑盒性能

    1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。

    2. 靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于1.0 pg/mL。

    3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

    4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

    5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

    6. 有效期:6個(gè)月

    進(jìn)口原料,準(zhǔn)確性高,靈敏度較高,針對(duì)血清血漿樣本,有專用的緩沖液,避免計(jì)算“負(fù)值"


    免責(zé)聲明

    1.  試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。

    2.  嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書(shū)操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)



    如果你對(duì)大鼠胰島素ELISA試劑盒感興趣,想了解更詳細(xì)的產(chǎn)品信息,填寫(xiě)下表直接與廠家聯(lián)系:


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