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技術(shù)文章 / article
HAKATA16010-159新生牛血清出廠檢測(cè)
2017-06-06 瀏覽次數(shù)：1343
HAKATA16010-159新生牛血清通常作為補(bǔ)充成分添加在基礎(chǔ)培養(yǎng)基內(nèi)使用。它能夠提供各種大分子蛋白，小分子量營養(yǎng)，水溶性成分的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，和其它一些細(xì)胞在體外所必需的成分，如激素和附著因子。血清可以結(jié)合或中和一些生長因子中的有毒成分，并提供培養(yǎng)基的緩沖能力。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)血清的添加依賴于基礎(chǔ)培養(yǎng)基的化學(xué)組成，培養(yǎng)細(xì)胞的類型，及所用的培養(yǎng)系統(tǒng)。
HAKATA16010-159新生牛血清出廠檢測(cè)是相當(dāng)嚴(yán)格的，產(chǎn)品的出廠檢測(cè)要經(jīng)過5道程序：
1.化學(xué)檢測(cè)
滲透壓：使用凝固點(diǎn)降低的方法檢測(cè)滲透壓。我們每天使用美國國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)我們的滲透壓檢測(cè)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。
測(cè)定pH值：同樣每天使用美國國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)pH計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)
電泳圖譜：鑒定血清的整體性質(zhì)。樣品被加到醋酸纖維素介質(zhì)中并在緩沖體系內(nèi)遷移。條帶經(jīng)染色、清潔、干燥后用密度儀進(jìn)行掃描以檢測(cè)白蛋白和球蛋白組分的相對(duì)濃度。
氧合血紅蛋白檢測(cè)：為證實(shí)是否在適當(dāng)?shù)臈l件下進(jìn)行采血和處理，使用修飾的Fleming方法對(duì)血紅蛋白進(jìn)行分光光度檢測(cè)。
血清總蛋白檢測(cè)：隨著動(dòng)物年齡的增加血清總蛋白含量也相應(yīng)地增加。使用自動(dòng)化的Biuret方法進(jìn)行總蛋白的測(cè)定以確證動(dòng)物年齡。
2.免疫球蛋白的檢測(cè)
HAKATA用高敏感度及高專一性的ELISA方法，來測(cè)定胎牛血清的免疫球蛋白G含量。
3.微生物檢測(cè)
使用美國藥典版推薦的方法進(jìn)行微生物的檢測(cè)以確定無細(xì)菌和真菌的污染。
所有的血清都使用Barile & Kern的大體積方法檢測(cè)支原體。收集的樣品至少在肉湯中培養(yǎng)個(gè)星期，同時(shí)要進(jìn)行至少4個(gè)在瓊脂平板上的亞培養(yǎng)。瓊脂平板在有氧和厭氧條件下36℃保溫，每周進(jìn)行一次微生物檢驗(yàn)。使用Dienes染色的方法進(jìn)行支原體菌落的檢測(cè)。對(duì)接種的肉湯要定期進(jìn)行濁度和pH值變動(dòng)的檢測(cè)。同時(shí)，所有的血清也要使用Hoechst 熒光DNA染色的方法進(jìn)行不可在肉湯中培養(yǎng)的支原體篩查。
4.病毒檢測(cè)
HAKATA血清嚴(yán)格按照美國聯(lián)邦法規(guī)Title9CFR, Part 113.53中關(guān)于動(dòng)物來源產(chǎn)品成分的要求來進(jìn)行病毒的檢測(cè)。
雖然HAKATA法保證所有的血清均無潛在的病毒污染，但我們可以保證所有的血清均經(jīng)過完整的病毒檢測(cè)，符合美國細(xì)胞培養(yǎng)制品的產(chǎn)品管理要求。血清是由動(dòng)物身上所采集的生物制品，而這些動(dòng)物身上或許帶有病毒，因此病毒檢測(cè)便是要偵測(cè)血清中是否含有可能影響細(xì)胞株的病毒。地方性的病毒如非細(xì)胞病理性的BVD病毒可能存在于某批血清中，這批血清就不能培養(yǎng)對(duì)此病毒敏感的細(xì)胞。
5.穩(wěn)定性檢測(cè)程序
在不同的時(shí)間間隔對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè)，以確定在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存條件下*的zui長期限。
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